Éclosion hospitalière de Pseudomonas aeruginosa résistant au carbapénème produisant du VIM-, une nouvelle métallo-β-lactamase transférable

Un total d’isolats de Pseudomonas aeruginosa a été recueilli auprès de différents patients dans différents services de l’hôpital universitaire de Vérone, en Italie, de février à février. Le niveau élevé de résistance à la concentration inhibitrice minimale des carbapénèmes imipénem a toujours été de & gt; μg / mL et d’autres β-lactames à large spectre et le taux d’hydrolyse de l’imipénème et son inhibition par l’acide éthylènediamine-tétraacétique suggèrent tous la production d’une sonde d’ADN spécifique à la métallo-β-lactamase A hydrolysant le carbapénème. Un profil génomique cloné hybridé à tous les isolats Un profil génomique d’empreintes génétiques a révélé la parenté clonale des isolats Une description de cette éclosion hospitalière est rapportée, dont l’occurrence confirme que la prolifération des souches productrices de métallo-β-lactamase se multiplie contre β- les lactames sont déjà une réalité à l’extérieur du Japon Ces résultats soulignent la nécessité d’une reconnaissance précoce des isolats similaires

Les Pseudomonas aeruginosa sont parmi les bactéries les plus souvent isolées des infections nosocomiales. Elles présentent une résistance intrinsèque à plusieurs agents antimicrobiens, y compris la plupart des β-lactamines, et portent souvent des déterminants de résistance acquis qui réduisent davantage leur spectre de sensibilité Les carbapénèmes ont les spectres antipseudomonaux les plus larges. de tous les β-lactamines et jouent un rôle fondamental dans le traitement des infections à P. aeruginosa La résistance aux carbapénèmes est souvent associée à la perte de la protéine D de la membrane externe – kDa, rebaptisée OprD Une diminution de l’expression de l’OprD accompagne la surexpression du système d’efflux multidrogue MexE-MexF-OprN, expliquant ainsi la résistance au carbapénème observée chez ces souches Chez les souches déficientes en OprD, la production dérépressée de β-lactamases chromosomiques contribue significativement à la résistance à l’imipénem , mais plus préoccupante sont les rapports de plus en plus fréquents de “carbapénémases”, c’est-à-dire enzym es qui sont capables d’hydrolyser les carbapénèmes avec une cinétique rapide Jusqu’à récemment, la présence d’isolats de P aeruginosa produisant des carbapénémases acquises n’avait été signalée qu’en Extrême-Orient, où le déterminant mobile blaIMP codant pour la métallo-β-lactamase à spectre large IMP- Récemment, cependant, des isolats de P aeruginosa producteurs de carbapénémases ont également été détectés au Royaume-Uni, en Italie et au Portugal [ -], suggérant que ce redoutable mécanisme de résistance pourrait bientôt devenir un problème mondial.L’isolat de P aeruginosa producteur de carbapénémases en Italie VR- / a été obtenu à l’hôpital universitaire de Vérone, au nord de l’Italie, et a produit une nouvelle métallo-β-lactamase, a été nommé VIM- Like IMP-, il présente une spécificité de substrat très large et est codé par un blaVIM déterminant porté sur une cassette de gène mobile insérée dans un integron Suite à l’isolement de VR- /, une analyse systématique des isolats de P aeruginosa a été réalisée au Centre Hospitalier Universitaire de Vérone sur une période d’un an afin d’étudier la prévalence globale d’isolats résistants au carbapénème provenant d’échantillons cliniques non urinaires. présence de blaIMP, blaVIM, ou d’autres déterminants de carbapénémases acquises dans les souches résistantes Cette étude a détecté la présence d’isolats de P aeruginosa supplémentaires produisant des variants VIM ou apparentés du même hôpital Nous avons réalisé une analyse rétrospective des cas à partir desquels le métallo-β P aeruginosa produisant de la lactamase ont été isolés, y compris l’évaluation de divers paramètres cliniques et épidémiologiques et de certaines caractéristiques pertinentes des isolats microbiens

Matériaux et méthodes

talloenzyme: résistance à l’imipénème; la résistance à d’autres ß-lactames à large spectre, tels que la ceftazidime; et susceptibilité à ou un phénotype intermédiaire à aztréonamantibiotiques Des solutions de travail ont été préparées le jour d’utilisation à partir de poudres standard de laboratoire de tous les composés spécifiés par les fabricants Meropenem a été fourni par Zeneca Milan, Italie Imipénem sans cilastatine a été fourni par Merck Sharp & amp; Dohme Rome, Italie Tous les autres antibiotiques provenaient de sources commerciales. Tests de susceptibilité Les tests de susceptibilité du disque ont été réalisés et interprétés selon les derniers documents NCCLS du Comité national pour les essais cliniques Les tests de sensibilité aux antimicrobiens ont été dilués en série dans la gélose Mueller-Hinton. BBL Microbiology Systems, Cockeysville, MD et interprétés comme décrit dans les derniers documents NCCLS Essais de β-lactamase Les taux d’hydrolyse de l’antibiotique μM par extraits soniques de cellules ont été obtenus comme décrit précédemment avec un spectrophotomètre BIRMAN-DUO ultraviolet Palo Alto , CA, avec des lectures enregistrées à -s intervalles pour min, opérant à la longueur d’onde à laquelle la différence entre les valeurs d’extinction de la molécule hydrolysée et non-hydrolysée était maximale Les longueurs d’onde exactes utilisées étaient les suivantes: ceftazidime, nm; La valeur d’absorbance différentielle millimolaire pour tous les β-lactames testés était de mM / cm pour l’imipénème et la ceftazidime et mM / cm pour le méropénème, aux longueurs d’onde respectives. L’inhibition de l’activité enzymatique par l’EDTA a été déterminée par mesure de la carbapénémase résiduelle activité après incubation de l’extrait brut pour min à ° C en présence de mM d’EDTA Un contrôle sans EDTA a toujours été effectué en parallèle La réactivation par Zn a été déterminée en mesurant l’activité carbapénémase après incubation de la préparation enzymatique traitée à l’EDTA pendant min. ° C en présence de mM Zn, comme décrit précédemment Des contrôles pour l’effet de Zn seul sur l’activité enzymatique et la stabilité du substrat ont également été inclus. Analyse iso-focalisante La focalisation isoélectrique en gel a été réalisée en% gels de polyacrylamide contenant des ampholytes. Appareil II Pharmacia-LKB Biotechnology, Uppsala, Suède Les gels ont été focalisés à ° C et W pendant min. La valeur pI du point tric a été déterminée en focalisant μg de chaque enzyme purifiée. Les β-lactamases ont été détectées en recouvrant le gel avec de la nitrocefine en mmol / mL en tampon de phosphate mmol / mL, pH, appliqué comme un papier filtre imbibé de nitrocefin. recouvrir le gel avec de la gélose nutritive contenant de l’imipénème et écouvillonner un germe sensible sur l’agar Caractérisation des protéines de la membrane externe Les membranes externes ont été préparées par un procédé rapide produisant des degrés appréciables de purification. Les cellules ont été cultivées à Luria-Bertani bouillon jusqu’à la phase exponentielle tardive de croissance, récolté par centrifugation, lavé une fois avec du tampon mP HEPES-NaOH pH contenant du fluorure de phénylméthylsulfonium mM, et remis en suspension dans le même tampon. La suspension a été soniquée avec le disrupteur ultrasonique mentionné ci-dessus. impulsions de sonication avec un s intervenant dans la glace Les cellules non brisées ont été enlevées par centrifugation à g pendant min, et les membranes ont été p Les culots ont été remis en suspension dans des mL de tampon HEPES-NaOH mM, pH, et stockés à – ° C. La teneur en protéines des échantillons a été déterminée avec un kit de dosage de protéines Bio-Rad Laboratories. Les protéines externes ont été séparées par électrophorèse sur gel de dodécylsulfate de sodium-polyacrylamide SDS-PAGE essentiellement comme décrit par Laemmli Les protéines ont été détectées par coloration au bleu de Coomassie Electrophorèse sur gel en champ pulsé L’ADN chromosomique PFGE a été préparé à partir de chaque souche pour analyse par PFGE par la méthode décrite par Smith et Cantor modifiée par Ichiyama et al et digérée par XbaI pour les fragments d’ADN à ° C ont été séparées avec un appareil CHEF DR III Bio-Rad Half-strength Tris borate-EDTA fonctionnant tampon a été utilisé, et l’électrophorèse a été effectuée à ° C pour h à V Le temps d’impulsion a été rampé linéairement dans un temps avant initial de s et un temps avant final de s Interprétation du bagout de restriction d’ADN ns généré par PFGE était selon les directives proposées par Tenover et al Colony blot hybridation L’hybridation par transfert de colonies a été réalisée avec des cellules cultivées directement sur des filtres de nitrocellulose stériles Schleicher & amp; Schuell, Keene, NH en couches sur gélose Mueller-Hinton La lyse cellulaire, la préhybridation et l’hybridation ont été réalisées essentiellement comme décrit ailleurs Les sondes ADN ont été marquées au P par la technique d’amorçage aléatoire avec un kit commercial Boehringer, Mannheim, Allemagne. sonde spécifique était un fragment HindIII-kb interne au gène blaIMP La sonde spécifique de blaVIM était un amplicon généré par PCR contenant la séquence codante blaVIM entière de P aeruginosa VR- /

Résultats

Origines et criblage des isolats Des souches prélevées sur des spécimens non urinaires pendant la période de février à février, autant que les souches% ont été isolées des voies respiratoires inférieures, alors que les pourcentages nettement plus faibles de souches provenaient de plaies chirurgicales%, pansements pharyngés des patients % des isolats,% démontraient une résistance à l’imipénème CMI, ⩾ μg / mL Parmi ces isolats,% de tous les isolats présentaient également une résistance à la CMI de la ceftazidime, ⩾ μg / mL, et de ce dernier groupe% de tous les isolats également prouvé sensible ou intermédiaire à l’aztréonam MIC, & lt; Ces isolats ont été sélectionnés pour d ‘autres expériences.Analyse de la production de carbapénémases Dans l’ une des souches sélectionnées à l ‘étape précédente, la souche VR – / était l’ une d ‘entre elles, les extraits bruts sans cellules présentaient une hydrolyse rapide des deux imipénèmes. Le méropénemase a été inhibé par un traitement à l’EDTA et a pu être complètement restauré après l’ajout de Zn à l’échantillon traité à l’EDTA (voir aussi Lauretti et al. Sur la base de ces données, tous les isolats ont été jugés éligibles pour une analyse ultérieure. Comme tous ces isolats ne présentaient aucune zone d’inhibition dans le test de sensibilité de Kirby-Bauer, un huitième isolat partageant la même caractéristique, à savoir VR- /, avait été à l’origine ignoré comme résistant à l’aztréonam, a également été examiné pour la production de métallo-β-lactamase. Le test était également positif avec cet isolat, qui était t Après un développement avec de la nitrocefin, la concentration isoélectrique analytique des extraits bruts des isolats a révélé de multiples bandes d’activité de ß-lactamase dans chacune d’entre elles, y compris une grande bande plus des valeurs mineures à des pH alcalins ~ – et Les bandes pI alcalines ont probablement été fournies par la céphalosporinase AmpC résidente de P aeruginosa, alors que la bande acide dont la valeur était similaire à celle précédemment rapportée pour VIM- était due à la carbapénémase, comme démontré par sa détection au moyen de la procédure de recouvrement de gel avec imipénème Une sonde spécifique de blaVIM dérivée du gène blaVIM cloné à partir de VR- / a donné un fort signal d’hybridation avec tous les isolats producteurs de carbapénémases dans des expériences d’hybridation colonie, avec l’intensité du signal similaire à celui obtenu avec VR- / aucun des isolats ci-dessus a été reconnu par une sonde spécifique à blaIMP dans un essai d’hybridation similaire Associations cliniques des isolats sélectionnés Les isolats étudiés provenaient de différents patients hospitalisés. La plupart d’entre eux avaient été isolés chez des patients ayant reçu diverses combinaisons d’agents antimicrobiens, notamment céphromes à large spectre, ceftriaxone ou ceftazidime, imipénème, ou les deux. les associations cliniques des isolats de P aeruginosa portant le gène de la métallo-β-lactamase sont résumées dans le tableau et une brève description analytique de chacune d’entre elles est rapportée ci-dessous

Il a été transféré du département de neurologie à l’unité de soins intensifs ICU en janvier et a été ventilé mécaniquement avec de l’imipénème administré par voie intraveineuse tous les h a été initié le lendemain de l’admission et n’a jamais été interrompu. P aeruginosa isolat VR- / a été isolé du pus d’une plaie chirurgicale le jour de l’imipénème jour après l’admission à l’USI Décès survenu le jour après l’admission à l’ICUPatient GB Patient GB était un homme d’un an admis dans l’unité coronarienne Il a été opéré le lendemain de l’admission pour un implant de prothèse aortique Serratia marcescens a été isolé à la suite d’une opération bronchique. Le patient a été transféré à l’USI le lendemain de l’intervention en raison d’une insuffisance cardiaque postopératoire et d’un choc. g iv chaque h a été commencé le jour de l’admission et n’a jamais été interrompu digestion difficile. P aeruginosa isolate VR- / was isola Le patient a été finalement libéré de l’hôpital après un autre jour. Patient SL Patient SL était un homme âgé d’un an qui a été libéré de l’unité de soins intensifs et transféré au service de gériatrie. Il a été opéré en janvier parce qu’il souffrait d’un cancer du côlon avec métastases hépatiques. Pendant son hospitalisation, il a fréquemment été admis aux soins intensifs pour le placement des cathéters veineux centraux. La thérapie consistait en ceftazidime g iv tous les jours et l’imipénème par voie h. Le patient a été transféré au département de médecine en mai, mais il est décédé quelques jours après avoir été admis.Patient RS Patient RS était un garçon de – un an-âge avec la leucoencéphalopathie admise à l’unité de soins intensifs en mai pour les déficits neurologiques sévères et les convulsions généralisées Le lendemain de l’admission aux soins intensifs, le traitement par ceftriaxone iv tous les jours, en raison de l’apparition de fièvre ° C- ° C Citrobacter freundii a été isolé à partir de l’aspiration bronchique le jour du traitement par la ceftriaxone après l’admission des isolats de P aeruginosa VR- / et VR- / ont été isolés de l’aspiration bronchique Patient CE Le patient CE était une femme âgée de -13 ans qui a subi une chirurgie en mai pour pancréatite nécrotique aiguë. Au cours des mois suivants, plusieurs micro-organismes, à savoir Klebsiella pneumoniae, P aeruginosa sensible à l’imipénème, Bacteroides fragilis, Stenotrophomonas maltophilia, et Acinetobacter baumannii ont été isolés à partir de cultures sanguines et d’aspirations bronchiques, malgré des traitements consécutifs à l’imipénem g iv toutes les h et à la ceftazidime iv Toutes les h hospitalisations à l’hôpital de jour à l’USI pour le placement des cathéters veineux centraux. finalement transféré à l’unité de soins intensifs à la fin de juillet en raison d’un choc grave. Le lendemain de l’admission au CU, traitement par l’imipénème par voie intraveineuse en raison de l’apparition de fièvre ° C et s’est poursuivi pendant plusieurs jours. Isolat VR aeruginosa isolé dans l’hémoculture un jour après l’arrêt du traitement le lendemain de l’admission. à l’ICUPatient BC Patient BC était un homme d’un an admis à l’USI à la fin de janvier parce qu’il avait subi un accident vasculaire cérébral, suivi d’une grave ischémie cérébrale et d’une coma thérapie avec de l’amoxicilline et de l’acide clavulanique. le jour de l’admission et n’a jamais été interrompu P aeruginosa isolat VR- / a été isolé de l’aspiration bronchique le jour après l’admission, et le patient est décédé le même jour Fatigué CF Patient CF était un homme d’un an atteint de leucémie aiguë admis au département d’hématologie en février pour recevoir une greffe de moelle osseuse. Le lendemain de la transplantation, le traitement a été instauré avec de la ceftazidime iv toutes les heures en raison de l’apparition de la fièvre (° C). a continué pendant des jours isolement de P aeruginosa VR- / a été isolé à partir d’un écouvillon pharyngeal le jour de thérapie de ceftazidime; Test de susceptibilité Les résultats des tests de sensibilité des agents antimicrobiens avec les isolats blaVIM-positifs sont présentés dans le tableau Tous les isolats ont démontré une résistance élevée aux carbapénèmes, à tous les autres spécimens. céphèmes de spectre incluant le ceftazidime MIC, ⩾ & gt; μg / mL, et aux pénicillines protégées par un inhibiteur; Les CMI de l’aztréonam semblaient être plus faibles et, en dehors de l’isolat VR- /, inférieur au seuil de résistance μg / mL. Tous les isolats démontraient également une résistance élevée aux agents non β-lactamines, incluant la quinolone ciprofloxacine et les aminoglycosides gentamicine et tobramycine. ; l’amikacine avait des valeurs de CMI similaires qui, toutefois, permettraient de classer les souches comme «intermédiaires» selon les points de rupture du NCCLS CMI, μg / mL

Tableau View largeTélécharger les profils de susceptibilité des isolats de Pseudomonas aeruginosa portant le gène blaVIM metallo-β-lactamaseTable View largeTélécharger les profils de susceptibilité des isolats de Pseudomonas aeruginosa portant le gène blaVIM métallo-β-lactamaseAnalyse des protéines de membrane externe Analyse des gels SDS-PAGE de Les protéines membranaires ont révélé que tous les isolats étaient dépourvus d’une protéine de la membrane externe présente chez un sujet sensible. En comparant ces patrons SDS-PAGE avec ceux d’une paire de souches de référence sensibles à l’imipénème et à l’imipénème , il était possible pour confirmer l’absence virtuelle d’une protéine de masse moléculaire apparente très proche d’OprD

Figure View largeTélécharger DiapositiveDodécylsulfate de sodium-gel de polyacrylamide électrophorèse des protéines de la membrane externe à partir d’isolats cliniques de Pseudomonas aeruginosa Lane, Marqueurs de poids moléculaire: β-galactosidase,; phosphorylase B,; l’albumine bovine, l’albumine d’oeuf, et l’anhydrase carbonique, Lane, la souche B Lane résistante à l’imipénème, la souche C sensible à l’imipénème, la souche VR- / Lane, VR- / Lanes sensible à l’imipénème, VR- / en doublons et, VR- / en doublon Lane, VR- / Lane, VR- / Lanes et, VR- / en double Lane, VR- / Lane, VR- / Figure View largeTélécharger slideSodium dodécyl sulfate-polyacrylamide gel électrophorèse des protéines de la membrane externe à partir d’isolats cliniques de Pseudomonas aeruginosa Lane, marqueurs de poids moléculaire: β-galactosidase,; phosphorylase B,; l’albumine bovine, l’albumine d’oeuf, et l’anhydrase carbonique, Lane, la souche B Lane résistante à l’imipénème, la souche C sensible à l’imipénème, la souche VR- / Lane, VR- / Lanes sensible à l’imipénème, VR- / en doublons et, VR- / en doublon Lane, VR- / Lane, VR- / Lanes et, VR- / en double Lane, VR- / Lane, VR- / Analyse clonale des isolats blaVIM-positifs Les patrons de macrorestriction de l’ADN chromosomique des isolats blaVIM-positifs, obtenus après digestion avec XbaI, ont été analysés par PFGE. Les profils de restriction se sont révélés identiques dans les isolats et différents pour la bande chez les isolats, suggérant que tous ces isolats étaient apparentés par clonage. profil de VR- / était différent pour & gt; bandes des autres profils, suggérant que ce n’était pas clonalement lié à la figure d’autres

Figure View largeTélécharger diapositive Electrophorèse en champ pulsé de l’ADN génomique clivé par XbaI des isolats cliniques de Pseudomonas aeruginosa λ, λ Ladder Marqueur d’ADN Marqueurs d’ADN indiquées Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / strain de contrôle, pas lié à l’épidémieFigure View largeTélécharger slide Electrophorèse en gel à champ pulsé de l’ADN génomique clivé par XbaI des isolats cliniques de Pseudomonas aeruginosa λ , λ Ladder Marqueur d’ADN Tailles d’ADN indiquées Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / Lane, VR- / souche témoin, non liée à l’éclosion

Discussion

Dans certains cas, la présence de P aeruginosa porteur d’un déterminant de métallo-β-lactamase similaire dans un contexte nosocomial est la plus développement inquiétant du point de vue épidémiologique, car il pourrait constituer un réservoir pour la dissémination du gène de résistance. La diffusion des métallo-β-lactamases est très perturbante car, contrairement à ce qui est apparu lors de la première apparition de résistance au carbapénème, les isolats les enzymes ne restent généralement pas sensibles à la plupart des β-lactamines à large spectre [-,,] Le fait que le déterminant blaVIM soit porté sur un élément génétique mobile du type cassette de gène pourrait faciliter sa propagation rapide parmi les principaux gram pathogènes-négatifs Dans la souche d’index VR- /, le gène blaVIM était apparemment porté sur le chromosome et n’était pas transférable par conjugaison à Escheric hia coli Il serait intéressant d’étudier si un autre fond génétique similaire est également trouvé dans les autres isolats blaVIM-positifs et d’effectuer des expériences de transfert avec eux En outre, parce que la détection du déterminant blaVIM a été réalisée par hybridation sur filtre, il serait également intéressant de séquencer les déterminants blaVIM des différents isolats, et notamment celui de la souche génétiquement non apparentée, pour vérifier l’existence de variants alléliques de ce déterminant de résistanceAnalyse de la chimiothérapie antimicrobienne reçue par les patients avant l’isolement du blaVIM-positif P aeruginosa a révélé que seuls les patients avaient reçu un traitement par l’imipénème, alors que les autres avaient reçu des β-lactamines non parabutane, y compris des céphalosporines à spectre élargi ou, dans un cas, un amoxicilline / clavulanate. Des observations similaires ont également été rapportées dans les épidémies multifocales japonaises. bâtonnets gram-négatifs blaIMP-positifs, où l’utilisation antérieure de carbapenems ont pu être confirmés pour seulement% des patients, alors que% des patients ont été céphainés avant l’isolement des isolats blaIMP-positifs et ces souches ont également été isolées chez des patients qui n’avaient pas reçu d’antibiotiques, ce qui suggère que P aeruginosa contenant des métalloenzymes se propagent en tant qu’infections hospitalières sans utilisation d’antibiotiques Il convient de rappeler qu’à l’occasion de l’émergence de résistances liées à l’OprD, des souches résistantes à l’imipénème n’ont pas été isolées pendant le traitement par l’imipénème . Les isolats de cette épidémie présentaient une résistance élevée non seulement aux carbapénèmes et à la plupart des autres β-lactamines, mais aussi aux fluoroquinolones et à plusieurs aminosides. La résistance croisée aux antibiotiques non apparentés indique la présence simultanée de déterminants de résistance supplémentaires tels que les gènes modifiant les aminoglycosides. enzymes, mutations qui régulent à la hausse les systèmes d’efflux, ou les deux, qui sont communs parmi nosocomial isolats de P aeruginosa Les différentes MIC de gentamicine pour VR- / μg / mL et VR- / & gt; μg / mL, qui ont été isolés du même patient avec une différence d’isolement d’un jour, étaient probablement liés à l’acquisition d’un nouveau déterminant de résistance aux aminoglycosides par cette dernière, malgré le fait qu’aucune chimiothérapie antimicrobienne n’était administrée entre les isolements. Il convient de noter que tous les P aeruginosa blaVIM-positifs manquaient de la protéine de membrane externe OprD et que l’absence de ce canal entraînait l’acquisition d’une résistance à l’imipénème. Ainsi, la présence simultanée de mécanismes de résistance au moins dans tous les isolats nous empêchait de évaluer si l’acquisition de ce nouveau gène de métallo-β-lactamase seul est suffisante pour conférer une résistance élevée aux carbapénèmes ou si la présence simultanée d’une modification de la perméabilité de la membrane externe est nécessaire pour l’expression d’une résistance élevée au carbapénème, IMP- Ce dernier cas impliquerait l’existence potentielle, chez les producteurs de métallo-β-lactamases, de Les souches résistantes aux evel ou même des souches qui, bien que présentant une sensibilité réduite au carbapénème, sont toujours classées comme «sensibles» selon les seuils d’interprétation et seraient difficiles à détecter dans les tests de susceptibilité de routine. Des souches similaires auraient sans doute été manquées à cause du protocole de Notre étude et son exigence de résistance à l’imipénème comme critère de sélection préliminaire Lors du criblage des producteurs de métallo-β-lactamases, des isolats résistants à l’imipénème et à la ceftazidime, sensibles ou intermédiaires à l’aztréonam, n’ont pas produit de carbapénémase détectable. activité Un phénotype similaire pourrait refléter la contribution de différents mécanismes de résistance, tels qu’une combinaison de défauts de perméabilité et d’efflux actif. Ces isolats méritent sans aucun doute un examen plus approfondi pour déterminer la base moléculaire de leur phénotype de résistance.

Remerciements

Hiroshi Nikaido nous a gentiment fourni les souches B et C de aeruginosa P. Nous remercions Andrea Di Clemente et Paola Piccoli pour leur excellente assistance technique et Anthony Steele pour son aide dans la version anglaise de ce document